प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी ने जैविक नमूनों को देखने और उनका अध्ययन करने की हमारी क्षमता में क्रांति ला दी है, जिससे हमें कोशिकाओं और अणुओं की जटिल दुनिया में जाने की अनुमति मिली है। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी का एक प्रमुख घटक प्रकाश स्रोत है जिसका उपयोग नमूने के भीतर फ्लोरोसेंट अणुओं को उत्तेजित करने के लिए किया जाता है। पिछले कुछ वर्षों में, विभिन्न प्रकाश स्रोतों का उपयोग किया गया है, जिनमें से प्रत्येक की अपनी अनूठी विशेषताएं और फायदे हैं।
1. बुध दीपक
50 से 200 वाट तक का उच्च दबाव वाला पारा लैंप, क्वार्ट्ज ग्लास का उपयोग करके बनाया गया है और आकार में गोलाकार है। इसके अंदर एक निश्चित मात्रा में पारा होता है। जब यह संचालित होता है, तो दो इलेक्ट्रोडों के बीच एक डिस्चार्ज होता है, जिससे पारा वाष्पित हो जाता है, और गोले में आंतरिक दबाव तेजी से बढ़ जाता है। इस प्रक्रिया में आमतौर पर लगभग 5 से 15 मिनट का समय लगता है।
उच्च दबाव वाले पारा लैंप का उत्सर्जन इलेक्ट्रोड डिस्चार्ज के दौरान पारा अणुओं के विघटन और कमी के परिणामस्वरूप होता है, जिससे प्रकाश फोटॉन का उत्सर्जन होता है।
यह मजबूत पराबैंगनी और नीले-बैंगनी प्रकाश का उत्सर्जन करता है, जो इसे विभिन्न फ्लोरोसेंट सामग्रियों को उत्तेजित करने के लिए उपयुक्त बनाता है, यही कारण है कि इसका व्यापक रूप से फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी में उपयोग किया जाता है।
2. क्सीनन लैंप
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी में आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला एक अन्य सफेद प्रकाश स्रोत क्सीनन लैंप है। क्सीनन लैंप, पारा लैंप की तरह, पराबैंगनी से निकट-अवरक्त तक तरंग दैर्ध्य का एक व्यापक स्पेक्ट्रम प्रदान करते हैं। हालाँकि, वे अपने उत्तेजना स्पेक्ट्रा में भिन्न हैं।
मरकरी लैंप अपने उत्सर्जन को निकट-पराबैंगनी, नीले और हरे क्षेत्रों में केंद्रित करते हैं, जो उज्ज्वल फ्लोरोसेंट संकेतों की पीढ़ी सुनिश्चित करता है लेकिन मजबूत फोटोटॉक्सिसिटी के साथ आता है। नतीजतन, एचबीओ लैंप आमतौर पर निश्चित नमूनों या कमजोर प्रतिदीप्ति इमेजिंग के लिए आरक्षित होते हैं। इसके विपरीत, क्सीनन लैंप स्रोतों में एक चिकनी उत्तेजना प्रोफ़ाइल होती है, जो विभिन्न तरंग दैर्ध्य पर तीव्रता की तुलना की अनुमति देती है। यह विशेषता कैल्शियम आयन सांद्रता माप जैसे अनुप्रयोगों के लिए फायदेमंद है। ज़ेनॉन लैंप भी निकट-अवरक्त रेंज में, विशेष रूप से 800-1000 एनएम के आसपास, मजबूत उत्तेजना प्रदर्शित करते हैं।
एचबीओ लैंप की तुलना में एक्सबीओ लैंप के निम्नलिखित फायदे हैं:
① अधिक समान वर्णक्रमीय तीव्रता
② अवरक्त और मध्य-अवरक्त क्षेत्रों में मजबूत वर्णक्रमीय तीव्रता
③ अधिक ऊर्जा उत्पादन, जिससे उद्देश्य के एपर्चर तक पहुंचना आसान हो जाता है।
3. एल ई डी
हाल के वर्षों में, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी प्रकाश स्रोतों के क्षेत्र में एक नया दावेदार उभरा है: एलईडी। एलईडी मिलीसेकंड में तेजी से ऑन-ऑफ स्विचिंग का लाभ प्रदान करते हैं, नमूना एक्सपोज़र समय को कम करते हैं और नाजुक नमूनों के जीवनकाल को बढ़ाते हैं। इसके अलावा, एलईडी लाइट त्वरित और सटीक क्षय प्रदर्शित करती है, जिससे दीर्घकालिक लाइव सेल प्रयोगों के दौरान फोटोटॉक्सिसिटी काफी कम हो जाती है।
सफेद प्रकाश स्रोतों की तुलना में, एल ई डी आमतौर पर एक संकीर्ण उत्तेजना स्पेक्ट्रम के भीतर उत्सर्जित होते हैं। हालाँकि, कई एलईडी बैंड उपलब्ध हैं, जो बहुमुखी बहु-रंग प्रतिदीप्ति अनुप्रयोगों की अनुमति देते हैं, जिससे आधुनिक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी सेटअप में एलईडी एक तेजी से लोकप्रिय विकल्प बन गया है।
4. लेज़र प्रकाश स्रोत
लेज़र प्रकाश स्रोत अत्यधिक मोनोक्रोमैटिक और दिशात्मक होते हैं, जो उन्हें उच्च-रिज़ॉल्यूशन माइक्रोस्कोपी के लिए आदर्श बनाते हैं, जिसमें STED (उत्तेजित उत्सर्जन कमी) और PALM (फोटोएक्टिवेटेड लोकलाइज़ेशन माइक्रोस्कोपी) जैसी सुपर-रिज़ॉल्यूशन तकनीकें शामिल हैं। लेजर प्रकाश को आमतौर पर लक्ष्य फ्लोरोफोर के लिए आवश्यक विशिष्ट उत्तेजना तरंग दैर्ध्य से मेल खाने के लिए चुना जाता है, जो प्रतिदीप्ति उत्तेजना में उच्च चयनात्मकता और सटीकता प्रदान करता है।
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप प्रकाश स्रोत का चुनाव विशिष्ट प्रयोगात्मक आवश्यकताओं और नमूना विशेषताओं पर निर्भर करता है। यदि आपको किसी सहायता की आवश्यकता हो तो कृपया बेझिझक हमसे संपर्क करें
पोस्ट करने का समय: सितम्बर-13-2023