प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप एक प्रकार का ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप है जो नमूने को रोशन करने और नमूने में फ्लोरोक्रोम को उत्तेजित करने के लिए उच्च तीव्रता वाले प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है। नमूने की रोशनी आम तौर पर एक प्रकाश स्रोत से की जाती है जो पराबैंगनी प्रकाश उत्सर्जित करती है। इनका व्यापक रूप से जैविक, चिकित्सा और औद्योगिक क्षेत्रों में उपयोग किया जाता है।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी कैसे काम करता है?
एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप पराबैंगनी प्रकाश उत्पन्न करने के लिए पारा या क्सीनन लैंप का उपयोग करता है। प्रकाश माइक्रोस्कोप में आता है और एक द्विध्रुवीय दर्पण से टकराता है - एक दर्पण जो तरंग दैर्ध्य की एक सीमा को दर्शाता है और दूसरी सीमा को गुजरने की अनुमति देता है। डाइक्रोइक दर्पण नमूने तक पराबैंगनी प्रकाश को परावर्तित करता है। कुछ नमूने पराबैंगनी प्रकाश के तहत प्राकृतिक रूप से प्रतिदीप्त होते हैं क्योंकि उनमें क्लोरोफिल जैसे प्रतिदीप्त पदार्थ होते हैं। यदि देखा जाने वाला नमूना प्राकृतिक रूप से फ्लोरोसेंट नहीं है, तो इसे फ्लोरोक्रोमेस नामक फ्लोरोसेंट रंगों से रंगा जा सकता है।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी किससे बना होता है?
1. प्रकाश स्रोत
सबसे आम प्रकाश स्रोत पारा, क्सीनन और एलईडी हैं। प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के लिए पारा प्रकाश की सर्वोत्तम गुणवत्ता प्रदान करता है। एलईडी अधिक लोकप्रिय हो रहे हैं क्योंकि वे अन्य स्रोतों की तुलना में कम महंगे हैं और कम बिजली की खपत करते हैं।
| बुध दीपक | क्सीनन लैंप | नेतृत्व किया | |
| उत्सर्जित प्रकाश की तरंगदैर्घ्य | 350-370 एनएम | 400 एनएम ~ 450 एनएम | 400-700 एनएम |
| जीवनकाल(घंटा) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| फ़ायदा | 1. उच्च तीव्रता प्रकाश, सबसे आम प्रकाश स्रोत। 2. यह सभी प्रकार के फ्लोरोफोर्स को उत्तेजित करने के लिए मजबूत पराबैंगनी और नीले-बैंगनी विकिरण का उत्सर्जन करता है। 3. उज्ज्वल और रंगीन छवियाँ। | 1. वर्णक्रमीय तीव्रता स्थिर है। 2. अवरक्त और मध्य-अवरक्त में मजबूत वर्णक्रमीय तीव्रता। | 1. बदलने में आसान. 2. गर्म करने की कोई जरूरत नहीं. 3. तुरंत चालू और बंद किया जा सकता है। 4. प्रकाश स्रोत की तीव्रता को नियंत्रित करें। |
| हानि | 1. एक छोटा जीवनकाल. 2. लंबा वार्मअप समय। | 1. अधिक गर्मी के लिए विशेष कम वोल्टेज डीसी पावर बॉक्स की आवश्यकता होती है। 2. मरकरी लैम्प से भी अधिक महँगा | 1. यूवी प्रकाश पारा लैंप से कमजोर है। 2. प्रकाश की प्रत्येक तरंग दैर्ध्य को उनके द्वारा उत्सर्जित संकीर्ण बैंडविड्थ के कारण एक अलग एलईडी की आवश्यकता होती है। |
मरकरी फ्लोरोसेंट अटैचमेंट
एलईडी फ्लोरोसेंट अटैचमेंट
2. उत्तेजना फ़िल्टर
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के संचालन के लिए उत्तेजना फिल्टर आवश्यक है। यह छोटी तरंग दैर्ध्य के प्रकाश को प्रवाहित करता है, जिसे फ्लोरोसेंट डाई अवशोषित कर सकती है। साथ ही, यह रोमांचक प्रकाश के अन्य स्रोतों को भी अवरुद्ध कर देता है।
उत्तेजना फ़िल्टर (बी, जी, यू, वी)
3. डाइक्रोइक दर्पण
डाइक्रोइक दर्पण एक प्रकार का ऑप्टिकल फिल्टर है जो दूसरों को संचारित करते समय कुछ तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश को प्रतिबिंबित करता है। इसका उपयोग प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी में उत्तेजना और उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य को अलग करने के लिए किया जाता है।
4. उत्सर्जन फ़िल्टर
उत्सर्जन फिल्टर केवल फ्लोरोफोर द्वारा उत्सर्जित तरंग दैर्ध्य को पार करता है और इस बैंड के बाहर सभी अवांछित प्रकाश को रोकता है - विशेष रूप से उत्तेजना तरंग दैर्ध्य को।
5. फ्लोरोसेंट रंग
फ्लोरोसेंट रंग कार्बनिक यौगिक होते हैं जिनमें प्रतिदीप्ति का गुण होता है, जिसके द्वारा वे अत्यधिक रोशन पराबैंगनी प्रकाश से उत्तेजित होने के बाद अत्यधिक विपरीत दिखाई देने वाली हरी रोशनी उत्सर्जित करके एक फ्लोरोसेंट छवि बना सकते हैं। आमतौर पर इस्तेमाल होने वाले फ्लोरोसेंट रंग हैं; डीएपीआई (49,6-डायमिडीनो-2-फेनिलिंडोल), एक्रिडीन ऑरेंज, ऑरामाइन-रोडामाइन, एलेक्सा फ्लोरर्स, या डाइलाइट 488।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी कितने प्रकार के होते हैं?
1. ईमानदार एपिफ़्लोरेसेंस माइक्रोस्कोप:
यह प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का सबसे सामान्य प्रकार है। फ्लोरोफोर का उत्तेजना और प्रतिदीप्ति का पता लगाना एक ही प्रकाश पथ (यानी उद्देश्य के माध्यम से) के माध्यम से किया जाता है। अधिकांश प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी, विशेष रूप से जीवन विज्ञान में उपयोग किए जाने वाले, एपिफ़्लोरेसेंस डिज़ाइन के होते हैं।
बीएस-2081एफ रिसर्च फ्लोरोसेंट बायोलॉजिकल माइक्रोस्कोप
2. कन्फोकल प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप:
कन्फोकल प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप: इस प्रकार का प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप एक छवि बनाने के लिए फ्लोरोसेंट रोशनी के साथ लेजर स्कैनिंग को जोड़ता है। इसका उपयोग कई प्रकार के अनुप्रयोगों में किया जा सकता है, जैसे कोशिकाओं और ऊतकों का अध्ययन करना, कोशिकाओं के भीतर प्रोटीन और अन्य पदार्थों का पता लगाना और सामग्रियों की मोटाई को मापना।
बीएस-2081एफ रिसर्च फ्लोरोसेंट बायोलॉजिकल माइक्रोस्कोप
3. उलटा प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप
इस प्रकार के सूक्ष्मदर्शी का प्रकाश स्रोत और कंडेनसर ऊपर की ओर नीचे की ओर स्थित होते हैं। जांचे जा रहे नमूने की सतह के संबंध में रोशनी का कोण 90 डिग्री पर होना चाहिए।
बीएस-2095एफ इनवर्टेड फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के क्या फायदे और नुकसान हैं?
लाभ:
- जीवित जीवों में कोशिकाओं को नुकसान पहुंचाए बिना उनका अवलोकन करने में सक्षम बनाता है
- सटीक रंगों के साथ उच्च रिज़ॉल्यूशन वाली छवियां प्रदान करता है
- कोशिकाओं में जीवित प्रक्रियाओं के अध्ययन की अनुमति देता है
- कोशिकाओं के अंदर विभिन्न प्रकार के अणुओं, जैसे प्रोटीन या न्यूक्लिक एसिड, की पहचान करने के लिए उपयोग किया जाता है।
नुकसान:
-यह केवल फ्लोरोसेंट डाई से टैग की गई कोशिका के अंदर विशिष्ट संरचनाओं के अवलोकन की अनुमति देता है।
-प्रतिदीप्ति की प्रक्रिया के दौरान इलेक्ट्रॉन उत्तेजना के कारण फोटोब्लीचिंग फ्लोरोसेंट रंगों के प्रतिक्रियाशील अणुओं को प्रभावित कर सकती है। परिणामस्वरूप, प्रतिक्रियाशील रंग प्रतिदीप्ति उत्सर्जन तीव्रता की अपनी रासायनिक संपत्ति खो सकते हैं।
-फ्लोरोसेंट रंगों से रंगने के बाद कोशिकाएं फोटोटॉक्सिक प्रभाव के प्रति संवेदनशील होती हैं, क्योंकि फ्लोरोफोर अणु लघु-तरंग दैर्ध्य प्रकाश से उच्च ऊर्जा फोटॉन को अवशोषित करते हैं।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के अनुप्रयोग क्या हैं?
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का व्यापक रूप से जैव रसायन, कोशिका जीव विज्ञान, सूक्ष्म जीव विज्ञान, प्रतिरक्षा विज्ञान और चिकित्सा सहित अनुसंधान और अनुप्रयोग के विभिन्न क्षेत्रों में उपयोग किया जाता है।
1. जीव विज्ञान के क्षेत्र में, फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप फ्लोरोसेंट डाई लेबलिंग की मदद से सेलुलर और सबमरोस्कोपिक सेलुलर घटकों और गतिविधियों की सटीक और विस्तृत पहचान करने में सक्षम बनाता है।
2. चिकित्सा क्षेत्र में, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप बैक्टीरिया और वायरस की उपस्थिति और वितरण का पता लगाने के लिए, या सर्जरी की सुविधा के लिए सर्जिकल लक्ष्यों को लेबल करने में सहायता करने के लिए फ्लोरोसेंट अभिकर्मकों का उपयोग कर सकता है।
3. खनिज विज्ञान के क्षेत्र में, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का उपयोग अक्सर सहज प्रतिदीप्ति गुणों वाले पदार्थों, जैसे डामर, पेट्रोलियम, कोयला, ग्राफीन ऑक्साइड और अन्य खनिजों का अध्ययन करने के लिए किया जाता है।
4. सामग्री विज्ञान में, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का उपयोग कपड़ा उद्योग या कागज उद्योग में फाइबर-आधारित सामग्रियों का विश्लेषण करने के लिए किया जा सकता है।
पोस्ट समय: मार्च-14-2023